Діагностика грибкових захворювань - основні принципи та методи мікробіологічних досліджень

Виявити поразку і визначити збудника при ураженні грибка на перших етапах вкрай складно. Діагностування ускладнене тим, що патологія відразу ніяк не проявляється або має різноманітну симптоматику. Для визначення збудника беруть біоматеріал з тієї ділянки, яка вразила патогенна мікрофлора: мокротиння, частина шкіри, інфікований ніготь, кров, біопсію лімфовузлів або внутрішніх органів.

Що таке грибкові захворювання

Ця група патологій носить загальну назву мікози, яка характеризується ураженням паразитів внутрішніх органів, шкірних покривів, нігтів рук і ніг (оніхомікоз), може завдати серйозної шкоди здоров'ю пацієнта. Збудниками виступають грибкові бактерії (відносяться до царства «гриби»). Велика частина цієї флори сприятливо впливає на здоров'я людини, співіснуючи з ним у гармонії. Деякі з них можуть викликати розвиток захворювань, які завдадуть істотної шкоди, тому важливо виявити почати лікування проблеми максимально швидко.

Як виглядає

Причиною звернення до дерматолога стають, як правило, перші патологічні прояви хвороби. Клінічні ознаки будуть відрізнятися в залежності від місця зараження, збудника грибкового захворювання. Виділяють наступні типи патогенних мікроорганізмів:

• грибок Candida (Candida) – викликає кандидозні інфекції;
• Трихофітії (Trichophyton) – провокує інфекційні патології нігтів, шкіри, слизових оболонок;
• Криптококоз – атакує внутрішні органи, легені;
• Аспергільоз – грибкове захворювання, викликане зниженням імунітету.

При діагностиці може бути визначена одна з 2 груп інфекції по локалізації:

1. Поверхневе. Виявляється ураження шкіри, слизових, поширення на внутрішні органи не відбувається (інфекції, які викликані грибками роду трихофітії, кандида).
2. Системне. Визначається при ураженні внутрішніх органів, дисемінації паразитів з кров'ю (аспергільоз, криптококоз).

Збудники інфекції

Проникає патогенна мікрофлора через ранки на поверхні епідермісу, мікротравми, причиною захворювання може стати будь-яка подряпина, яка спровокує мікоз гладкої шкіри. Не справляється організм з атакою збудника при зниженні захисних функцій. При діагностиці часто визначають зараження родом трихофітон або Кандида. Останні викликають такі захворювання:

• молочниця;
• кандидоз у чоловіків;
• кандидоз ротової порожнини.

Існує більше декількох десятків збудників, їх ділять за методом ураження тканин. При діагностиці можуть виявити наступні види грибкових мікроорганізмів:

• глибокі системні мікози провокує Histoplasma capsulatum;
• субкутанные підшкірні мікози викликає Sportrichum schenckii;
• эпидермомикозы розвиваються за Epidermophyton floccosum;
• висівкоподібний лишай, поверхневий мікоз - Malassezia furfur;
• опортуністичні грибкові захворювання - Candida albicans.

Класифікація мікозів

Загальна назва всіх хвороб цього типу приховує під собою різні види ураження організму людини грибами. При діагностиці лікарі поділяють захворювання шкіри на 4 групи:

1. Кератомикозы. Місцем локалізації стає роговий шар епідермісу, в інших шарах шкіри запальні явища відсутні (пьедра, різнобарвний лишай, парша, споротрихоз). Викликають цю різновид патології такі гриби: Sporotrichium, Trichosporon, Piedraia, Exophiala, Pityrosporum.
2. Дерматомікози. Характеризуються вираженим запальним процесом, локалізуються на шкірі волосистої частини голови, на нігтях (фаус, трихофітія, епідермофітія, мікроспорія). Провокують патології наступні штами грибів: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.
3. Кандидамикозы. Зачіпає цей вид грибків слизові оболонки, шкіру та її придатки. Часто об'єктом атаки грибків роду Кандіда стають внутрішні органи.
4. Глибокі мікози. Провокують важкі зараження всіх шарів шкіри, внутрішніх органів, слизових оболонок, кісток, м'язів (мукороз, пенициллиоз, аспергільоз).

Виділяють окремо псевдомикозы (актіномікоз, еритразма), які не є захворюваннями грибкового типу, але за симптомами схожі з істинними мікозами. В цих випадках обов'язково потрібна диференціальна діагностика. Діагностика в таких випадках дуже важлива, тому що допомагає визначити тип грибкового ураження або виключити його. Від цього залежить призначення схеми лікування, його тривалість та ефективність.

Дерматомікози

Гриби-дерматофіти глибокого переймаються в шкіру, провокують дерматомікози, наприклад, такі відомі патології:

• мікроспорія;
• трихофітія;
• епідермофітія;
• руброфітія;
• фавус.

Відносять цей вид патології до різних хвороб, які створюють рубцеві зміни, деформацію кистей рук, нігтів стоп, зміна структури і випадання волосся. Збудники вражають верхні, глибокі шари шкіри, що призводить до появи фурункулоподобных вузлів, пустульозні висипань, великих вогнищ запалення. Для розвитку сприятливою умовою стає порушення гігієни стоп. Спочатку грибок росте на шкірі ніг, у міжпальцевих проміжках, потім переходить на нігті.

Кандидози

Патогенні мікроорганізми вражають глибокі і поверхневі шари шкіри, поширюються на нігті, волосся, внутрішні органи. Викликають хвороби гриби роду Кандида, хвороби відносяться до групи кандидамикозов. Виділяють наступні типи цих недуг:

• генералізовані;
• поверхневі;
• вісцеральні.

Належать гриби Candida до умовно-патогенних. Дріжджоподібні збудники можна виявити при діагностиці в кишечнику, ротової порожнини й у здорової людини. Стримує поширення патогенних мікроорганізмів сильний імунітет, а при його ослабленні починається активне розмноження кандид, що призводить до ураження шкірного покриву тулуба, ніг, голови, кистей. Клінічні зміни відзначаються при всіх типах кандидамикозов. Лікування залежить від тяжкості перебігу, види ураження.

Глибокий мікоз

Це вид захворювань, які зачіпають глибокі шари шкіри, внутрішні органи. Хвороби розвиваються при сильному зниженні захисних сил організму, зміні гормонального фону, порушенні обміну речовин. Відносять наступні патології до глибоких микозам:

• кокцидиоидоз;
• хромомикоз;
• риноспоридиоз;
• гістоплазмоз;
• споротрихоз;
• бластомікоз;
• мукороз;
• цефалоспориоз;
• мицетома;
• кладоспориоз;
• мадурская стопа;
• аспергільоз.

Кератомикоз

Це група патологій, які локалізуються тільки на кутикулах волосся, роговому, поверхневому шарі шкіри. Характерною ознакою кератомикозів стає відсутність запальних явищ. Збудниками хвороби є плісняві, дріжджоподібні гриби, дерматофіти (близько 70 видів патогенів). Провокують вони наступні захворювання:

• шимбери;
• білий лишай;
• чорний лишай;
• черепицеобразный мікоз;
• тропічний білий і жовтий лишай;
• вузлувата трихоспория;
• пьедра;
• різнобарвний (висівкоподібний) лишай.

Як діагностувати грибок

При підозрі на розвиток мікозу потрібно відразу ж звернутися за медичною допомогою. Вам знадобиться лікар дерматолог або мікології. Діагностика грибка нігтів починається з опитування пацієнта, щоб виявити можливі шляхи зараження. Спеціаліст запитує про контакт хворого з птахами, тваринами, які можуть переносити паразитів. Важливо уточнити не був людина в несприятливих регіонах інших країн, в яких умовах він живе.

Далі починається візуальний огляд, який допомагає визначити масштабність ураження, які ділянки поверглись впливу грибків. Лікар повинен звернути увагу на наявність імунодефіцитного стану пацієнта. Для визначення типу збудника необхідно зробити забір матеріалу, який відправляють на лабораторне дослідження. Досвідчений лікар може при первинному огляді поставити діагноз, але для складання схеми терапії потрібно все одно провести вивчення біоматеріалу. Для діагностики грибкових захворювань застосовують наступні методи:

• мікроскопія – дослідження під мікроскопом біоматеріалу, поширений і простий метод діагностики;
• дослідження під лампою Вуда – спеціальний спектр ультрафіолетового освітлення (люмінесценція) допомагає помітити грибкові ураження;
• бактеріологічний посів – точний спосіб діагностики, а його проведення займає 2-3 тижні, поки не виросте колонія на живильному середовищі;
• ПЛР-діагностика – найбільш точний спосіб визначення виду патогенної мікрофлори, але для точного діагнозу може знадобитися проведення декількох аналізів, що вимагає витрати грошей.

Лабораторні методи

Тільки своєчасний точно поставлений діагноз допоможе призначити ефективну схему терапії і скоротити тривалість курсу. Лабораторна діагностика грибкових захворювань є найбільш ефективним методом для визначення типу збудника. Для виявлення використовують такі варіанти дослідження:

• бактеріологічний посів;
• гістологічний аналіз;
• ПЛР-діагностування;
• імунологічне дослідження;
• мікробіологічні дослідження;
• культкуральное дослідження.

Диференціальна діагностика мікозів

Постановку точного діагнозу ускладнює те, що при різних видах мікозу з'являються різні симптоми. У таких випадках використовують диференціальний метод діагностики, порівнюють з іншими дерматологічними патологіями мікоз. Часто ознаки мікозу плутають з псоріазом, але при зіскоблюванні лусочок грибкова патологія не буде кровоточити. Подібна симптоматика спостерігається і з парапсориазом.

Лікар повинен виключити ймовірність розвитку нуммулярной екземи. Це особливий вид патології, який можна виявити тільки при лабораторній діагностиці. Часто ознаки грибка приймають за поліморфний фотодерматоз, який може розвиватися тільки у дорослої людини і ніколи не зустрічається у дитини. Лабораторна і диференціальна діагностика обов'язкова для постановки точного діагнозу, призначення грамотного лікування.

Мікробіологічна діагностика мікозів

Це найпростіший і поширений метод виявлення мікозу на шкірі і в крові. Для точного діагнозу необхідно зібрати матеріал для дослідження. При ураженні волосистої частини голови потрібно за допомогою пінцета зібрати уражені волосся, а з шкіри зробити зішкріб пошкодженої ділянки. Лабораторні дослідження при грибкових захворюваннях по мікробіологічному методі проводяться при приміщенні біоматеріалу в розчин гідроксиду калію 30%, потім на предметне скло.

Аналіз допоможе вывить, де розташований грибок (зовні або всередині шкіри, волосся), його розміри. Якщо забір матеріалу провести невірно, то аналіз може дати помилковий результат. Використовують для діагностики наступні методи мікробіологічної діагностики:

• мікроскопія з нативними та незабарвленими препаратами;
• мікроскопія з препаратами забарвленими.

Методи дослідження

При діагностиці фахівець повинен враховувати структуру міцелію (будова гіф, їх септированность, колір), особливості будови суперечка, кондиев, враховується їх колір, форма і розмір, будову клітинної стінки і т. д. Для дослідження готують нативні, пофарбовані препарати. Останні вимагають обробки матеріалу різними способами:

1. PAS-фарбування. Фарбування такого типу допомагає визначити в стінках мікроорганізмів нейтральні полісахариди. До них відноситься глюкан-маннановый комплекс, який знаходиться у клітинній стінці багатьох эумицетов. Він і провокує процес фарбування.
2. PAS-реакція. Використовується для діагностики грибкової інфекції тканинної форми. В лабораторії застосовують для цього дослідження різні модифікації, наприклад, забарвлення за Гридли або реакція Бауера.
3. Метод Грама. Забарвлення цим способом допомагає виявити наявність супутніх микрорганизмов.
4. Забарвлення по Циль-Нильсону. Допомагає визначити кислотостійкі мікроорганізми. Якщо біоматеріал рідкий, то готують спеціальний незабарвлений мазок у просвітлюючих рідинах для мікроскопії: в рівних пропорціях змішують гліцерин і спирт.

Культуральне дослідження на гриби

Поміщають посів біоматеріалу на живильне середовище (вирощування), щоб виділити чисту культуру при кімнатній температурі. Диморфні гриби в таких умовах утворюють міцелій, що при зростанні до 37 градусів починають формуватися дріжджоподібні клітини. Середовище Сабуро застосовується для дерматофітів та грибів Candida, для плесневелых (гифальных) необхідна середовище Чапека. Часто додають до складу антибіотик. Глибокі мікози можуть визначити тільки в клініко-лабораторних центрах з-за високої контагиозности.

Люмінесцентна діагностика грибкових захворювань

Для визначення уражених ділянок шкіри патогенною мікрофлорою роду Микроспорум використовують ультрафіолетову лампу. Це варіант експрес-діагностики, яка застосовується при необхідності підтвердити наявність шкірної інфекції, симптоми лишайных захворювань. Ультрафіолетове випромінювання не є головним способом визначення грибка, це допоміжний метод, тому виконувати її не обов'язково.

Для огляду хворого використовують лампу Вуда, вони випускає УФ випромінювання, під їх дією продукти життєдіяльності грибка світяться яскравим світлом. Колір залежить від того, який вид збудника вразив пацієнта:

• зеленуватий – лишай волосистої частини голови;
• блакитний – червоний вовчак на губах;
• жовтуватий – плоскі лишайные освіти.

Імунологічний ферментний аналіз крові на грибок

Для виявлення мікозів, вразили шкірні покриви, внутрішні органи (гістоплазмоз, кокцидиоидоз) використовують імунологічний ферментний аналіз крові на грибкові захворювання. Часто використовують цю методику у разі, якщо взяти біопсію тканин для вивчення певних причин не виходить. Ґрунтується методика на пошук титру антитіл до конкретного типу грибкового захворювання.

Для цих цілей використовують визначення IgG до аспергиллезу, кандидозу. Точність аналізу складає близько 80%, в окремих випадках можна отримати хибнопозитивний результат при відсутності глибоких мікозів. Трапляється це при наявності у хворого грибка слизової оболонки рота або запущеної форми молочниці. Для ІФА потрібно забір венозної крові, беруть його вранці рано або через 4 години після останнього прийому їжі. Іншої підготовки для проведення аналізу не потрібно.

Відповідь на аналіз буде через кілька діб після забору біоматеріалу. Рідко тривалість очікування перевищує 5 днів. Впливає на швидкість проведення дослідження якість обладнання в лабораторії, якщо є причини провести додаткове вивчення зразків крові. Пацієнту видають по завершенні процедури укладення, де буде вказано одне з значень:

• при підтвердженні наявності грибка буде написано «позитивний результат»;
• при відсутності повної впевненості, що був виявлений грибок в крові, пишуть «сумнівний результат»;
• при відсутності патогенної мікрофлори в зразку біоматеріалу пишуть «негативний результат»;
• при наявності хорошого устаткування при дослідженні крові можуть визначити концентрацію клітин мікозу та вказати показник в ув'язнення.

ПЛР-діагностика грибкових захворювань

Найбільш точним і достовірним способом діагностики грибка та інших інфекційних захворювань є полиразмерная ланцюгова реакція. Володіє метод діагностики наступними перевагами:

• низька вартість аналізу;
• висока точність;
• дослідження біоматеріалу проводиться швидко;
• для аналізу можна зібрати будь зразок тканин (частинку шкіри, слизової, зішкріб з підошви стоп, пальців рук, поверхні нігтів, волосся, кров).

Головний недолік цього дослідження – вузька спрямованість. Щоб діагностувати мікоз, потрібно точно знати, де він вразив організм людини. ПЛР визначає тип збудника, концентрацію в організмі хворого. Результати будуть відомі через добу, в деяких випадках (при відсутності несприятливих умов), відповіді приходять в день здачі (через 5-6 годин). Швидкість виконання дослідження залежить від правильності забору зразка, досвідченості медперсоналу, завантаженості роботою лабораторії.

Як визначити грибок в домашніх умовах

При вміння розпізнати симптоматику мікозних патологій і застосуванні домашніх методів діагностування, можна визначити вид патогена. Пацієнт повинен правильно оцінити перебіг хвороби, можна на перших етапах грибкове захворювання сплутати з псоріазом або лишаєм. Щоб цього уникнути, потрібно знати основні ознаки мікозу, які відрізняють його від інших недуг. Симптоми ураження грибком:

• нігті стають жовтого кольору, починають розшаровуватися;
• зміна форми нігтьової пластини;
• немає періодів ремісії та загострення, починається повне відшарування пластини, що не відбувається при шкірних патологіях і псоріазі;
• місце ураження має неприємний запах, болить при прикосновенно, з'являється свербіж, лущення, можуть утворюватися бляшки на поверхні шкіри;
• грибок вражає, як правило, міжпальцеві проміжки на одній або обох ногах, потім недуга поширюється на ніготь і всю ступню.

Діагностика грибка нігтів на ногах за допомогою перманганату калію

Якщо ви помітили, що нігті на руках, ногах почали видозмінюватися, з'явився неприємний запах, то можна прямо вдома перевірити наявність або відсутність інфекції. Вам знадобиться для проведення аналізу марганець, тепла вода і ємність. Процедура проводиться наступним чином:

1. Зробіть слабкий розчин марганцівки.
2. Занурте руки або ноги (уражені кінцівки) на 2-3 хвилини в ємність.
3. Якщо нігтьова пластина забарвилася в жовтий колір – ви здорові. Якщо ж забарвлення їх не змінилася, значить є інфекція.

Проба йодом на лишай

Це засіб легко знайти в аптеці і є у більшості людей вдома. Визначити сам грибок йод не допоможе, але може допомогти визначити наявність шкірних патологій на початковому етапі розвитку. Наприклад, засіб допомагає виявити висівкоподібний лишай, що вражає шкіру на руках і ногах. Проводиться дослідження наступним чином:

• при наявності ознак шкірного захворювання нанести тонким шаром йод на цю ділянку;
• зачекайте 2 хвилини;
• якщо проблема є, то вогнища ураження візьмуть насичене забарвлення;
• здорові ділянки шкіри виділяти не будуть.

Скільки коштує діагностика грибкових захворювань у клініках Москви

Відео

Дерматоскоп. Мікози: грибкові захворювання шкіри, нігтів і стоп

Зіскрібки з шкіри на грибок